■ 产品简介：
Y1HGold-GAL4-AbA 酵母单杂系统使用的菌株 Y1HGold 是 MATα 型，可直接转化质粒进行筛库试验。筛选标记为: ura3 ，leu2 ；报告基因为：AbAr 。
Y1HGold-GAL4-AbA 酵母单杂系统需要 pAbAi 和 pGADT7 两种质粒配套使用。质粒 pAbAi 的筛选标志为 URA，用于表达 pBait-AbAi construct (1~3 个 bait DNA 序列重复串联后克隆到 pAbAi 中)；质粒 pGADT7 的筛选标志为 LEU，用于表达 AD(GAL4 C 端 768~881 位氨基酸) 与目标蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4-AbA 酵母单杂系统原理：Aureobasidin A (AbA) 是一 种环酯肽抗生素，在低浓度(0.1-0.2 μg/mL) 下即可对酵母产生毒性。基因组中整合了 pBait-AbAi 的酵母菌株（Bait-Reporter Yeast Strains），当猎物蛋白（Prey）结合到诱饵序列 （Bait DNA）上，GAL4 AD 就会激活 AbAr 的表达，从而能够在含有抗生素 AbA 的培养基上生长。AbAr 与营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，可以降低酵母单杂假阳性发生的概率。
本方案中筛选诱饵酵母菌株的 AbA 最佳使用浓度和互作验证都采用了稀释点板的方法，与涂板的方法相比，点板法能更直观的体现出 DNA 和蛋白的互作，还能减少培养基和 AbA 的使用量。本方案中诱饵菌株鉴定采用了高保真酶，大大减少了操作步骤。
■ 质保及运输条件：
培养基系列质保 2 年，感受态制备试剂盒质保 1 年、鉴定试剂盒质保 1 年、甘油菌质保 1 年、感受态质保 3 个月；感受态干冰运输，其余产品冰袋运输；各类产品按照标签所表示温度进行储存。
注：
1. 本试剂盒提供的产品以产品组成为准。大概能用于 10 对单杂互作验证，例如，1 个诱饵和 10 个转录因子（质粒除外）。
2. 请按照感受态的需求量制备感受态，ZC135 中的试剂加入量可以按比例放缩。
3. 各组分需按照标签温度储存，感受态细胞务必 -80℃ 保存。
4. 对照菌株的最佳 AbA 浓度参考网站菌株说明书。
6. 感受态细胞配带有 Carrier DNA 和 PEG/LiAc。
7. 载体序列，在我司网站可以下载。
